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解离酶:胰蛋白酶
发表时间:[2020-03-22 18:55:03]
解离酶:胰蛋白酶
胰蛋白酶是一种胰丝氨酸蛋白酶,对涉及碱性氨基酸,精氨酸和赖氨酸的羧基的肽键具有特异性。胰蛋白酶是已知的最高度特异性的蛋白酶之一,尽管它也表现出一些酯酶和酰胺酶活性。
单纯纯化的胰蛋白酶通常对组织解离无效,因为它对细胞外蛋白几乎没有选择性。纯化的胰蛋白酶和其他酶(如弹性蛋白酶和/或胶原酶)的组合已被证明对解离有效。
“胰蛋白酶”也是商业供应商给胰酶的名称,胰酶是从猪胰腺中提取的蛋白酶,多糖酶,核酸酶和脂肪酶的粗混合物。NF 1:250,一种常用的“胰蛋白酶”制剂,具有在国家药典规定的测定条件下进行250倍于其酪蛋白重量的蛋白水解的能力。重要的是要认识到,尽管胰酶确实含有这种酶,但该测定方法并非对胰蛋白酶特异。尽管有命名法,但像“ NF 1:250”和“ 1:300”这样的粗制“胰蛋白酶”被广泛用于解离组织,这也许是因为胰蛋白酶和污染性的蛋白水解酶和多糖酶活性确实导致了对细胞外基质的优先攻击。看来,但是
在组织培养实验室中,研究人员使用纯化的胰蛋白酶将细胞从培养容器内表面上生长的单层细胞释放到悬浮液中。大多数源自正常组织且未高度适应人工培养条件的细胞以单层生长,即一层细胞厚的细胞层粘附在培养容器的内表面。由于此类细胞更像正常组织中的细胞,因此许多组织培养研究人员正在研究在单层培养中生长的细胞。
单层培养物通常在玻璃或聚苯乙烯滚瓶,培养瓶或培养皿中生长。组织培养工作中使用的塑料容器经过特殊处理,以确保细胞与血管壁的良好粘附。