worthington中的优化技术分离指南

尽管针对特定细胞类型的细胞分离程序的优化取决于具有各种所需特性的细胞的充分回收，但可以建立一些指导原则。本指南中有关细胞分离和所用酶的信息，结合逻辑和适当的实验设计，应可导致开发出令人满意的细胞分离方法。（有关详细讨论，请参见Freshney1987。）

细胞产量和活力之间的复杂关系可以通过左侧所示的简化图示表示。通常，存在一个在收率和生存力之间取得平衡的最佳回收率领域。在此范围的中间附近工作将减少细胞分离程序结果的可变性。了解这种关系以及它如何随特定单元格类型和应用程序而变化，可以使优化过程更加容易。

为了进行故障排除，下面列出了各种可能的结果以及建议的纠正措施。请记住，各象限之间没有清晰的界线，而是会聚具有可变重叠区域的会聚区域。

低产量/低生存力	解离过度/不足，细胞受损。改用消化率较低的酶和/或降低工作浓度。（例如，从胰蛋白酶到胶原酶/从2型胶原酶到1型）。
低产量/高生存力	在解离下。增加酶浓度和/或孵育时间，并监测产量和活力反应。   如果产量仍然很差，请评估一种消化率更高的酶和/或添加第二种酶。
高产量/低生存力	良好的解离，细胞损伤。酶消化过度和/或工作浓度过高。减少浓度和/或孵育时间，并监测产量和生存力响应。   尝试通过将牛血清白蛋白（BSA）（0.1-0.5％w / v）或大豆胰蛋白酶抑制剂（0.01-0.1％w / v）加入解离中来稀释蛋白水解作用。   尝试使用较少的蛋白水解酶，尽管产量可能会受到影响，应该进行监控。
高产量/高生存力	的地方是。考虑评估解离参数的效果，以了解其局限性，以备将来参考。