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worthington可行性衡量
发表时间:[2020-09-11 17:11:26]
优化技术:可行性衡量
估计细胞活力的最简单方法之一是染料排斥技术。该方法利用指示剂染料证明细胞膜受损。吸收染料的细胞会被染色,被认为是无生命的。台盼蓝,赤藓红和尼古丁等染料通常被使用,而台盼蓝在初步的细胞分离程序中最为常见。
该程序可以与细胞计数程序一起执行,但是可能需要调整细胞密度,以便获得每毫升大约10 6个细胞。
程序- 将1滴锥虫蓝与1滴细胞悬液混合,并等待1-2分钟进行吸收
- 按照“细胞定量”中所述准备血细胞计数器和负载室。
- 计数细胞总数和染色(深色)细胞数。
生存力百分比= | ||
总细胞数-染色细胞 | x 100 | |
总细胞数 |
例
总细胞数/ 1 mm 2 = 182个
染色细胞数= 24
生存力百分比= | 182-24 | = | 158 | x 100 |
182 | 182 | |||
= | 86.8%的生存能力 |
注意:与细胞附着或代谢分析相比,染料排斥生存力程序倾向于对细胞生存力进行高估,但对于细胞分离程序的优化,锥虫蓝的确能快速评估解离性能,并进行产量定量